Así funciona un Espectrofotómetro de Fluorescencia en el laboratorio

Antes de profundizar en el funcionamiento de un Espectrofotómetro de Fluorescencia, es fundamental comprender la fluorescencia en sí. La fluorescencia es un tipo de fotoluminiscencia en la que ciertas sustancias absorben luz en una longitud de onda (excitación) y luego emiten luz en una longitud de onda diferente, generalmente más larga (emisión).

Cuando una molécula absorbe luz, sus electrones se excitan a un estado de mayor energía. Cuando los electrones vuelven a su estado original, liberan energía en forma de luz. Esta luz emitida es la que medimos en espectrofotometría fluorescente.

Componentes de un espectrofotómetro fluorescente

Fuente de luz: Es un componente crítico. Las fuentes más habituales son las lámparas de xenón o los LED, que proporcionan la luz de excitación necesaria.

Filtros de excitación y emisión: Son esenciales para seleccionar las longitudes de onda de luz específicas. El filtro de excitación selecciona la longitud de onda para excitar la muestra, mientras que el filtro de emisión permite que solo la luz emitida llegue al detector.

Detector: Capta la luz emitida y la convierte en una señal medible. Los tubos fotomultiplicadores (PMT) y los fotodiodos son detectores de uso común.

Cómo funciona un espectrofotómetro fluorescente

El proceso de excitación: Primero, la fuente de luz dirige un haz de luz sobre la muestra a través del filtro de excitación. Esta luz excita las moléculas de la muestra, provocando que emitan fluorescencia.

Detección de emisiones: La luz emitida pasa luego a través del filtro de emisión y llega al detector, que mide la intensidad de la fluorescencia.

Aplicaciones en diversos campos

Diagnóstico médico: Se utilizan para diagnosticar enfermedades de forma temprana mediante la detección de biomarcadores específicos.

Monitoreo ambiental: Estos instrumentos ayudan a monitorear los niveles de contaminación al detectar contaminantes en el aire y el agua.

Análisis químico: La espectrofotometría fluorescente ayuda a identificar y cuantificar sustancias químicas, proporcionando datos de composición detallados.

Investigación biológica: Los investigadores utilizan estas herramientas para estudiar procesos biológicos complejos, como las interacciones de proteínas y los mecanismos celulares.crom