La ultracentrífuga es una técnica de separación que utiliza la fuerza centrífuga para separar partículas de diferentes tamaños. Puede realizar 150.000 rotaciones por minuto hacia arriba de 300.000 G. Esto permite que las partículas se separen en función de sus densidades debido a un gradiente de presión muy suave generado por el giro rápido y la gravedad. Esta técnica se usa comúnmente en aplicaciones de bioquímica, biología y biotecnología para fines como la purificación de moléculas biológicas a partir de mezclas de diferentes tamaños.
Durante la ultracentrifugación, una muestra que contiene las moléculas deseadas se coloca en un tubo, que luego se gira a velocidades muy altas para lograr separaciones eficientes. La ultracentrífuga se ha utilizado en varios campos de investigación, incluida la biología molecular y la bioquímica.
El proceso de trabajo de la ultracentrífuga
La ultracentrífuga utiliza la fuerza centrífuga para separar las moléculas más grandes de las más pequeñas según sus diferentes densidades. Es lo mismo que el centrifugado normal, pero las velocidades son mucho más altas. La centrifugación logra esta separación a través de un gradiente de presión generado por el giro rápido y la gravedad. La tasa de sedimentación para una partícula dada es cero cuando la densidad de la partícula y su entorno son iguales. En pocas palabras, las moléculas más rápidas giran en el centro del tubo, mientras que las moléculas más lentas se agrupan cerca del exterior del tubo.
¿Cómo utilizar la ultracentrífuga?
La ultracentrífuga consiste en una gran cámara circular con un rotor que gira a altas velocidades para generar fuerza centrífuga. Aquí hay algunos puntos importantes:
– Antes de usar, es importante asegurarse de que el rotor esté correctamente equilibrado. Puede hacer esto instalando un rotor vacío y haciéndolo funcionar a baja velocidad para verificar si hay desequilibrios. Las ultracentrífugas modernas están equipadas con un amortiguador que ayuda a absorber las vibraciones y reduce las oscilaciones armónicas. Si nota alguna vibración o tambaleo cuando el rotor gira, es posible que deba agregar pesos adicionales o realizar otros ajustes para lograr el equilibrio adecuado. Una vez que se logra el equilibrio óptimo, puede ejecutar experimentos estándar en sus muestras a velocidades más altas sin correr el riesgo de dañar o interrumpir sus resultados.
– La posición de las muestras dentro del rotor también es importante para garantizar resultados precisos. Por lo general, debe colocar materiales con una densidad alta (como precipitados de proteínas o perlas) en la parte inferior y aquellos con densidades más bajas (como ácidos nucleicos o virus) cerca de la parte superior. La configuración óptima de la muestra variará según sus experimentos particulares, por lo que debe consultar el manual del usuario u otros recursos para obtener orientación sobre cómo lograr los mejores resultados con sus muestras.
– Para garantizar un rendimiento óptimo, es importante limpiar periódicamente todos los componentes, incluidos el rotor, la cámara, el depósito de compensación, la tapa y las juntas. Es posible que deba realizar una limpieza más frecuente si está procesando muestras difíciles como suspensiones virales, ya que pueden ser propensas a obstruirse o contaminarse.