La ultracentrifugación es una técnica de separación por giro que utiliza la fuerza centrífuga para separar partículas de diferentes tamaños. Puede girar 150.000 rotaciones por minuto y más de 300.000 g. Esto permite que las partículas se separen en función de sus densidades debido a un gradiente de presión muy suave generado por el giro rápido y la gravedad. Esta técnica se utiliza comúnmente en aplicaciones de bioquímica, biología y biotecnología para fines como la purificación de moléculas biológicas a partir de mezclas de diferentes tamaños.
Durante la ultracentrifugación, una muestra que contiene las moléculas deseadas se coloca en un tubo, que luego se hace girar a velocidades muy altas para lograr separaciones eficientes. La ultracentrífuga se ha utilizado en diversos campos de investigación, incluida la biología molecular y la bioquímica.
La ultracentrífuga utiliza la fuerza centrífuga para separar las moléculas más grandes de las más pequeñas debido a sus diferentes densidades. Es lo mismo que la centrifugación normal, pero las velocidades son mucho más altas. La centrifugación logra esta separación a través de un gradiente de presión generado por el giro rápido y la gravedad. La velocidad de sedimentación de una partícula determinada es cero cuando la densidad de la partícula y su entorno son iguales. En pocas palabras, las moléculas más rápidas giran en el centro del tubo, mientras que las moléculas más lentas se agrupan cerca del exterior del tubo.
La ultracentrífuga es un equipo especializado que se utiliza en los laboratorios para separar partículas, moléculas o células en función de su densidad. Por lo general, consta de una gran cámara circular con un rotor que gira a altas velocidades para generar fuerza centrífuga. Esta fuerza empuja las partículas o moléculas en solución hacia el fondo de la cámara, lo que permite separarlas según su masa y densidad. Aquí hay algunas cosas que debe saber:
Antes de usarla, es importante asegurarse de que el rotor esté correctamente equilibrado. Puede hacer esto configurando un rotor vacío y haciéndolo funcionar a baja velocidad para verificar si hay desequilibrios. Las ultracentrífugas modernas están equipadas con un amortiguador que ayuda a absorber las vibraciones y reducir las oscilaciones armónicas. Si nota alguna vibración o tambaleo cuando el rotor gira, es posible que deba agregar pesos adicionales o realizar otros ajustes para lograr el equilibrio adecuado. Una vez que se logra el equilibrio óptimo, puede ejecutar experimentos estándar en sus muestras a velocidades más altas sin correr el riesgo de dañar o alterar sus resultados.
La posición de sus muestras dentro del rotor también es importante para garantizar resultados precisos. Generalmente, debes colocar los materiales con una alta densidad (como precipitados de proteínas o perlas) en la parte inferior y aquellos con densidades más bajas (como ácidos nucleicos o virus) cerca de la parte superior. La configuración óptima de la muestra variará según sus experimentos particulares, por lo que debe consultar el manual del usuario u otros recursos para obtener orientación sobre cómo lograr los mejores resultados con sus muestras.
Para garantizar un rendimiento óptimo, es importante limpiar y hacer mantención periódicamente todos los componentes, incluidos el rotor, la cámara, el depósito de amortiguación, la tapa y las juntas. Es posible que deba realizar una limpieza más frecuente si procesa muestras difíciles, como suspensiones virales, ya que pueden ser propensas a obstruirse o contaminarse.
Es importante almacenar adecuadamente su ultracentrífuga cuando no esté en uso para evitar daños u otros problemas. Debe mantener el rotor y la cámara firmemente bloqueados en su lugar usando las palancas o tornillos de bloqueo suministrados, y asegurarse de retirar completamente todas las muestras del dispositivo antes de guardarlo. Además, se debe evitar almacenar el dispositivo en áreas con altas temperaturas o humedad, ya que pueden provocar corrosión y otros daños.